Analyses Histologiques

Les analyses histologiques peuvent être effectuées sur biopsies ou pièces d’exérèse.
Chaque prélèvement réalisé doit être immédiatement conditionnés dans les kits fournis gratuitement sur simple demande, contenant du formol tamponné à 10%.
Respecter impérativement un ratio de 1:10 entre le volume tissulaire et le volume du fixateur (ratio permettant une bonne pénétration du formol au sein du tissu et donc une bonne fixation/conservation du prélèvement).

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Prélèvements tissulaires

– Biopsies : La valeur des biopsies repose sur :

  • le choix de la zone biopsiée
  • la taille et le nombre : 3 biopsies cutanées au minimum (4 à 6 mm diam), 6 biopsies digestives au minimum
  • la bonne préservation : limiter l’écrasement tissulaire et le dessèchement
  • le repérage topographique (fils de suture)

 

Télécharger les fiches pratiques :

Choix des sites de biopsie  –  Comment réaliser une biopsie cutané  –  Quand réaliser une biopsie cutanée

 

– Pièces opératoires :

  • Pièce volumineuse : utiliser plusieurs flacons numérotés et identifiés, sélectionner des fragments lésionnels représentatifs en évitant les zones nécrotico-hémorragiques.
  • Évaluation optimale des marges : orienter précisément la pièce opératoire (fil de suture, agrafe…).

 

 

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Fixation

– Immerger rapidement dans le formol (préservation de la morphologie cellulaire, absence d’autolyse), avec un volume suffisant (ratio de volume 1/10 entre tissu et fixateur), pendant un temps suffisant de 24-48 heures
– Kits de prélèvements fournis par le LAPV Amboise : flacons de formol prêts à l’emploi, à identifier (nom du propriétaire et/ou de l’animal).
– Formulaires de demande d’examen : à renseigner avec précision

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Envoi au laboratoire

Utiliser l’enveloppe Chronopost prépayée (acheminement rapide en 24h) dont le bordereau est téléchargeable en ligne. Pour les territoires français d’Outre-mer (DOM-TOM), nous contacter

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De l’échantillon à la lame

– Réception au laboratoire : Identification, enregistrement et traçabilité des prélèvements.
– Technique histologique (36 à 48h) :
Les prélèvements fixés au formol sont recoupés, mis en cassette, déshydratés, inclus en paraffine, coupés au microtome (coupe 4 µm), montés sur lame blanche puis colorés (Hémalun-Eosine).
Des colorations spéciales (histochimie) sont réalisées afin de préciser le diagnostic histopathologique :

  • PAS : Champignons, glycogène…
  • Bleu de Toluidine : Granulation métachromatique du mastocyte
  • Rouge Congo : Amyloïde
  • Trichrome de Masson : Collagène
  • Gram : Bactérie
  • Warthin Starry : Spirochète
  • Rhodamine : Cuivre
  • Fite Faraco : Mycobactérie

Des immuno-marquages (immunohistochimie) permettent de déterminer l’index de prolifération Ki 67 des tumeurs (mastocytome…), de typer les lymphomes (type B ou T) et de déterminer l’origine cellulaire d’une tumeur peu différenciée.

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Lecture des lames (microscopie optique), expertise histopathologique

Le compte rendu d’analyse comprend :

  • une description des lésions observées
  • un diagnostic morphologique et étiologique (conclusion)
  • un commentaire (diagnostic différentiel, examens complémentaires proposés, pronostic, orientation thérapeutique)

Le compte rendu est envoyé par mail en deux exemplaires, vétérinaire et propriétaire.
Le résultat vous est proposé dans les meilleurs délais (3 à 6 jours ouvrés) après réception des prélèvements au laboratoire sauf cas particuliers (nécropsie, fixation prolongée, coloration spéciale, décalcification…).